PCR基因擴(kuò)增儀是分子診斷實(shí)驗(yàn)室的重要工具,直接影響臨床檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性、重復(fù)性、甚至工作效率。其有著不同的分類與類型,所以我們一定要清楚。
PCR基因擴(kuò)增儀分類
1.普通的PCR儀
一次PCR擴(kuò)增只能運(yùn)行一個(gè)特定退火溫度的PCR儀,又叫傳統(tǒng)的PCR儀。
用途:主要是做一些簡(jiǎn)單的、對(duì)單一退火溫度的目的基因進(jìn)行擴(kuò)增。
(1)梯度PCR儀:一次PCR擴(kuò)增可以設(shè)置一系列不同的退火溫度條件(溫度梯度),通常為12種溫度梯度的普通PCR儀。
用途:研究未知DNA退火溫度的擴(kuò)增。
?。?)原位PCR:將具有細(xì)胞定位能力的原位雜交技術(shù)運(yùn)用于從細(xì)胞內(nèi)靶DNA的定位分析,在細(xì)胞內(nèi)實(shí)現(xiàn)基因擴(kuò)增的普通PCR儀。
用途:用于在細(xì)胞的靶DNA所在位置上進(jìn)行基因擴(kuò)增。
2.實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀
PCR擴(kuò)增時(shí)加入的引物利用熒光素進(jìn)行標(biāo)記,使引物和熒光探針同時(shí)與模板進(jìn)行特異性結(jié)合,擴(kuò)增結(jié)果通過(guò)熒光信號(hào)采集系統(tǒng)實(shí)時(shí)采集信號(hào)并輸送到計(jì)算機(jī)分析處理系統(tǒng),實(shí)時(shí)輸出量化結(jié)果,這樣的PCR儀叫實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀。
(1)金屬板式實(shí)時(shí)定量PCR儀
可作為普通PCR儀使用
可帶梯度功能
可容納的樣本量大,無(wú)需特殊耗材
溫度均一性欠佳,有邊緣效應(yīng),標(biāo)準(zhǔn)曲線的反應(yīng)條件難以做到與樣品*一致
?。?)離心式實(shí)時(shí)定量PCR儀
溫度均一性較好
使用的是同一個(gè)激發(fā)光源和檢測(cè)器,隨時(shí)檢測(cè)旋轉(zhuǎn)到跟前的樣品,有效減少系統(tǒng)誤差
可容納樣品量少,有的需用特殊毛細(xì)管作樣品管,增加了使用成本,也不帶梯度功能
?。?)各孔獨(dú)立控溫的定量PCR儀
不同樣品槽分別擁有獨(dú)立的智能升降溫模塊,各孔獨(dú)立控溫,適合多指標(biāo)快速檢測(cè)。
以上就是關(guān)于PCR基因擴(kuò)增儀的主要類型介紹。